微生物操作中常見問題有哪些

微生物操作中常見問題的討論與分析

1、劃線獲得單個菌落的方法。劃不出單個菌落的原因：

(1) 平板上有過多的水分；

(2) 劃線時接種環未經反復灼燒；

(3) 多區劃線，三區或四區劃線。

2、培養基配制時應注意的問題：

(1)滅菌溫度要嚴格控制，按照要求滅菌，尤其含糖量較高的培養基溫度不應太高，過高會導致糖分焦化，影響質量；

(2)瓊脂培養基不能反復溶化。反復溶化會破壞培養基中的營養成分；

(3)培養基不能反復滅菌，反復滅菌也會導致營養成分的破壞；

(4)含瓊脂的培養基滅菌后，要搖勻。

3、產品的保存：

(1) 干粉培養基：避光干燥，結塊后不能使用。

(2) 亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等：冷凍保存，使用時，要常溫解凍，避免水浴加熱。

(3) 抗生素類：冷藏保存，溫度過高會導致靈敏度的下降。

(4) 兔血漿：冷藏保存少量的紅色不會影響結果。

4、觀察時間的掌握：

按SN、GB等標準或培養基的使用說明所述時間進行觀察，時間過短或時間過長，單菌落的特征都不會很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養基，時間短單菌落看不到卵磷脂環，時間長綿羊李氏菌也會產生沉淀環。

5、添加劑的添加：

(1)溫度的掌握。卵黃和抗生素類添加的溫度都不應太高。

(2)定量。過多會抑制一些目標菌，太少又導致雜菌的過度生長。

6、接種方法：

常用的方法主要有劃線、三點接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。

7、生化實驗：

(1)接種的方法

(2)氧化型和發酵型實驗操作

(3)陽性菌種的對照

(4)接種前的純化。挑取單個菌落進行一系列的生化。