最新牛奶中微生物的檢測方法,牛奶微生物檢測方法一覽
早上喝一杯牛奶,吸收豐富蛋白質、鈣等營養,有益又健康!牛奶中微生物的含量是評價牛奶質量的一個重要指標。但由于牛奶含水量較高,加之PH值接近中性,導致各種微生物都可在其中生長和繁殖。牛奶微生物總數過高,會影響消費者健康,所以牛奶中微生物的含量是評價牛奶質量的一個重要指標,接下來,我們來看看牛奶中微生物的檢測方法。
一、牛奶中主要微生物
1、病原微生物
2、有害微生物
3、有益微生物
二、牛奶中微生物檢測方法
1、免疫分析法
酶聯免疫吸附法(ELISA)的基本原理是抗原與抗體的特異反應,將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產生顏色反應,用于定量測定。酶聯免疫技術的應用,大大提高了檢測的敏感性和特異性,現已被廣泛地應用于多種微生物的檢測。有報道使用ELISA方法研究檢測出生乳中的布魯氏菌。
2、PCR法
聚合酶鏈式反應(PCR)是以待擴增的2條DNA 鏈為模板,由一對人工合成的寡核苷酸作為引物,通過 DNA 聚合酶促反應,在體外進行特異性 DNA 序列擴增。PCR 技術對生乳微生物如沙門氏菌、無乳鏈球菌、大腸桿菌、單增李斯特氏菌、金**葡萄球菌和蠟樣芽孢桿菌等都能成功進行檢測。PCR 技術具有操作簡單、快速、靈敏度高、特異性強等特點。
3、電化學阻抗法
電化學阻抗技術的原理是細菌在培養基內生長繁殖的過程中,會將培養基中的大分子電化學惰性物質,如碳水化合物、蛋白質等代謝為具有電活性的小分子物質,如乳酸鹽、醋酸鹽等,使培養基的電化學性質發生變化。通過檢測培養基的在電極表面體現的電壓、電流、電阻抗等變化情況,即可判定細菌在培養基中的生長、繁殖特性。該技術的優點是高敏感性、特異性、快速反應性和高度重復性等。有報道運用電阻抗技術快速分析牛奶中菌落總數,結果表明電導、總阻抗、雙電層電容可作為阻抗檢測參數,且檢測結果準確。
4、ATP生物發光法
ATP 生物熒光技術是在熒光素酶的作用下,由ATP 激活,熒光素被氧化,發生能量躍遷產生熒光光子,熒光強度與 ATP 濃度在一定范圍內線性相關。而ATP 在生物活細胞內的含量大致一定。從而可測出樣品中微生物含量。有報道探索利用 ATP 生物發光技術測定生乳中細菌量的可行性;結果表明 ATP 生物發光技術具有準確、便利等優點,可用于生乳中細菌的快速檢測。
5、流式細胞計數法
流式細胞計數法通常以激光作為發光源,經過聚焦整形后的光束垂直照射在樣品流上,被熒光染色的細胞在激光束的照射下產生散射光和激發熒光。光散射信號基本上反映了細胞體積的大小,熒光信號的強度則代表了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內物質的濃度,由此可通過儀器檢測散射光信號和熒光信號來估計微生物的大小、形狀和數量。流式細胞計數具有高度的敏感性,可同時對目的菌進行定性和定量。有報道研究了應用流式細胞術檢測生乳中細菌總數的方法,結果表明流式細胞術與平皿菌落計數法相關程度為顯著相關,并該方法極大的縮短了檢測時間。